Лабораторная диагностика исследования суставных жидкостей

Снижение вязкости суставной жидкости происходит при выделении воспалительного экссудата в синовиальную жидкость, а также при нарушении выработки гиалуроновой кислоты, что наблюдается при воспалительном артрите. Для определения уровня вязкости СЖ можно использовать тест на вязкость.После снятия иглы или колпачка со шприца СЖ по каплям поступает в пробирку. В норме спинномозговая жидкость образует "струну" длиной около 5 см перед разрывом. При патологии спинномозговая жидкость может прилипать к стенке пробирки и не стекать вниз. Жидкость с плохой вязкостью образуется короткими порциями (3 см) или вытекает из шприца и стекает по стенке пробирки, как вода.Свертываемость. Спинномозговая жидкость разрушается в присутствии фибриногена, захваченного во время пункции или предыдущей травмы. Иногда в СЖ находятся "рисовые тельца" – это разрушенная суставная мембрана, покрытая сгустками фибрина (рис. 2.2 Б). Рис. 2.2 Включения синовиальной жидкостиА. «Молотый перец» –хронотические осколки;В. «Рисовые тельца» –обогащенные фибрином фрагменты синовиальной оболочкиТакая картина характерна для ревматоидного артрита. Сгустки в образцах мешают подсчету клеток. Помещение части образца в пробирку, содержащую гепарин, может помочь предотвратить коагуляцию СЖ. Образование муцинового сгустка. Тест на свертывание муцина, также известный как "веревочный тест", представляет собой оценку целостности комплекса гиалуроновая кислота–белок (муцин). Нормальная суставная жидкость образует плотную веревочную ткань при добавлении уксусной кислоты. Процедура получения сгустка муцина варьируется в разных лабораториях, о чем свидетельствуют различные соотношения жидкости и кислоты, согласно различным литературным источникам. Для стандартизации диагностического подхода к процедурам обследования СЖ необходимо разработать местные и федеральные стандартные рабочие процедуры (СОП). Во всех случаях интерпретация образования сгустка одинакова. Плотный сгусток муцина, который долго распадается, указывает на хорошую целостность гиалуроната (рис. 2.3). Рыхлый сгусток муцина легко распадается, это происходит из-за разрушения или разжижения гиалуроната.Рис. 2.3 Тест на муциновый сгусток нормальной синовиальной жидкости Дополнительные методы исследования- биохимические, бактериологическое, иммунологическоеИзучены следующие химические свойства синовиальной жидкости, роль которых имеет диагностическое значение: кислотность (рН); ряд биохимических и иммунологических показателей. Кислотность синовиальной жидкости (pH). Нормальное значение pH CЖ находится в диапазоне 7,29 – 7,60. Определение рН экспресс-методом осуществляется методом сухого химического анализа с использованием индикаторных полосок (с шагом менее 0,5!) или лабораторного рН-метра. Пример: можно определить рН сухим химическим путем на тест-полосках с визуальным контролем и сравнением по контрольной шкале "Универсальная индикаторная бумага рН 0-12" (ООО «Экросхим»); рН-тест - универсальный показатель рН для экспресс-химического анализа водородного индекса жидких сред, ООО «Биосенсор-АН» (Россия) и др. Химические исследования должны проводиться комплексно — это определение концентрации белка, глюкозы и активности некоторых ферментов. Общая концентрация белка. В нормеСЖ отсутствуют высокомолекулярные белки (фибриноген, макроглобулины), а общее количество белка составляет 5-32 г / л (или треть от уровня в крови). Повышение содержания белка выше 30 г/л отмечается при заболеваниях, протекающих с явлениями синовита. Соотношение альбумин / глобулин обычно составляет 2,5 - 4,0. При воспалительных процессах среди белковых фракций преобладают глобулины с большой молекулярной массой, а соотношение альбумин/глобулин снижается до 0,5 – 2,0. Причиной этого является повышение проницаемости синовиальных оболочек и увеличение выработки γ-глобулинов. Концентрация других белков острой фазы, таких как-1-антитрипсин,церулоплазмин, компоненты системы калекриин-кенин, фибриноген, лактоферрин, также повышается в СЖ при воспалительных процессах. Электрофорез и иммуноэлектрофорез используются для изучения белкового спектра суставной жидкости. Увеличение белка в составе СЖ отмечается при болезни Бехтерева, артрите, артропатии, болезни Крона и язвенном колите, подагре, псориатическом артрите и синдроме Рейтера. Определение общего белка CS возможно на автоматических или полуавтоматических биохимических анализаторах с использованием биуретического метода на длине волны 540 нм, с использованием любого доступного диагностического набора для количественной оценки общего содержания белка в сыворотке или плазме крови в клинико-диагностических лабораториях. Для изучения белкового спектра синовиальной жидкости используется метод электрофореза и иммуноэлектрофореза. В этом случае для учета результатов используется горизонтальная камера для электрофореза с источником питания, гребенки, агарозным гелем и трансиллюминатором. Во время электрофореза белковые фракции определяются в виде полос различной ширины с характерным участком в геле, специфичным для каждого типа белка. Чтобы определить долю каждой фракции в общем количестве белка, оценивается интенсивность полос. Концентрация глюкозы в суставной жидкости у здоровых лиц составляет 4,2 - 5,5 ммоль/л. При воспалительных процессах в полости сустава вследствие гликолиза и жизнедеятельности микробной флоры уровень глюкозы снижается. Для получения более надежных данных о содержании глюкозы в СЖ пациент должен голодать не менее 8 часов перед исследованием, а исследование следует проводить сразу после получения суставной жидкости и последующего центрифугирования. Благодаря использованию специальных пробирок со стабилизатором глюкозы и специальной обработке внутренней поверхности образец CЖ может храниться длительное время (до 24 часов) без изменения его исходного состояния. Концентрацию глюкозы определяют методом глюкооксидазным без депротеинизации. Принцип метода основан на окислении β-D-глюкозы кислородом воздуха, в результате чего под действием глюкозооксидазы образуется эквимолярное количество перекиси водорода. Под действием пероксидазы перекись водорода окисляет хромогенные субстраты с образованием окрашенного продукта, который регистрируется на длине волны 510 (490-540) нм. Активностьлактатдегидрогеназы (ЛДГ) в суставной жидкости повышается при ревматоидном артрите, инфекционном артрите, подагре. Интерпретация ЛДГ часто затруднена из-за отсутствия контрольных интервалов для СЖ. Уровень ЛДГ может быть повышен, в то время как уровень в сыворотке крови остается нормальным. Нейтрофилы, которые увеличиваются во время острой фазы заболевания, способствуют повышению уровня ЛДГ в синовиальной жидкости. Определение активности ЛДГ оптимизировано кинетическим методом. Принцип метода основан на способности ЛДГ катализировать реакцию образования лактата из пирувата с участием кофермента никотинамидадениндинуклеотида (НАДН2), измерение активности ЛДГ проводится на длине волны 340 нм. Это исследование может быть выполнено на полуавтоматических или автоматических биохимических анализаторах с использованием доступного диагностического набора для определения активности ЛДГ в сыворотке или плазме крови. Концентрация гиалуроновой кислоты и гликозаминогликанов в СЖ выше, чем в сыворотке крови. Гиалуроновая кислота — это особый протеогликансиновиальной жидкости, который обеспечивает ее вязкоупругие свойства. В суставной жидкости здорового сустава содержится около 2,45 - 3,97 г / л гиалуроновой кислоты. Его концентрация снижается в первые дни после травмы сустава и операции на суставе, поскольку уменьшается экссудат СЖ и подавляется биосинтетическая активность синовиоцитов. Параллельно отмечалось повышение активности гиалуронидазы, которая постепенно снижается по мере уменьшения выраженности воспалительного процесса. Источниками ферментов в суставной жидкости, помимо сыворотки крови, являются синовиоциты и нейтрофилы, активность которых в СЖ ниже, чем в сыворотке крови. При воспалительных процессах в синовиальной жидкости наблюдается повышение активности лизосомальных ферментов. Определение активности ферментов гликолиза, таких как гексокиназы, лактатдегидрогеназы, целесообразно при хроническом синовите. Определение концентрации гиалуроновой кислоты и гликозаминогликанов проводится с помощью ионной хроматографии с последующим количественным определением путем введения Дише с карбозолом. Этот метод трудоемкий и экономически дорогостоящий, поэтому это исследование не получило широкого распространения в КДЛ.ЗаключениеИсследование источников современной литературы, позволило сделать вывод о том, что синовиальная жидкость играет важную роль в поддержании здоровья суставов. Она обеспечивает смазку и питание хрящевой ткани, а также амортизирует нагрузку на суставы. Кроме того, синовиальная жидкость содержит клетки и молекулы, которые могут указывать на наличие воспаления или других патологических процессов в суставе.Исследование синовиальной жидкости проводится путем пункции сустава. Врач вводит иглу в суставное пространство и собирает небольшое количество жидкости для анализа. Затем полученная проба синовиальной жидкости анализируется в лаборатории, где определяются ее физические и химические свойства, а также свойства, а также осуществляется микроскопический и бактериологический анализ.При исследовании синовиальной жидкости анализируется такие показатели, как цвет, прозрачность, вязкость, наличие кристаллов, клеток, белка и других химических веществ. Также определяется наличие возбудителей инфекционных заболеваний, если таковые имеются. Эти показатели могут указывать на наличие воспаления, травмы, артрита или других патологических процессов в суставе.Осветив тему диагностического значенияклинико-лабораторного исследования синовиальной жидкости, можно с уверенностью говорить о том, что исследование суставной жидкости позволяетвыявитьразличные заболевания суставов, такие как ревматоидный артрит, остеоартрит, подагра, воспалительный артрит и другие. Инфекционные заболевания, такие как сепсис или туберкулез суставов, также могут быть обнаружены при анализе синовиальной жидкости.Список используемой литературыЮлдашева Л. Р., Полевая Ю. А., Сапожкова Ж. Ю. Клинико-лабораторное исследование синовиальной жидкости в диагностике заболеваний суставов. Ч. 1. // Лабораторная и клиническая медицина. Котёлкина А.А., Стручко Г.Ю., Меркулова Л.М., Кострова О.Ю., Стоменская И.С., Тимофеева Н.Ю. Характеристика синовиальной жидкости в норме и при некоторых патологических процессах. ActaMedicaEurasica 2017; 4: 24–30.Матвеева Е.Л., Гасанова А.Г., Спиркина Е.С. ФГБУ «Российский научный центр «Восстановительная травматология и ортопедия» им. акад. ГА. Илизарова», Минздрава России (2018)https://journals.eco-vector.com/1994-9480/article/view/119210Крылов П. А. Морфофункциональная характеристика системы «суставной хрящ – синовиальная жидкость» в условиях нормальных и повреждающих нагрузок на сустав: диссертация ... кандидата Биологических наук 2018.- 134 с.Абдрахманова, И.Л. Сердюк, Ю.В. Ослопова, Р.Н. Хасанова Учебно-методическое пособие «Внутренние болезни. Основные принципы обследования пациентов с заболеваниями суставов» Казань: Казан. ун-т, 2017 – 58 с.Теплова Л.В., Еремеева А.В., Байкова О.А., Суворова Н.А. Ревматические проявления гипотиреоза. Современная ревматология 2017; 11(2): 47–53, https://doi.org/10.14412/1996-7012-2017-2-47-53.Липатов И.А., Букша И.А. Патохимические процессы при подагре. Обзор литературы. Вестник Челябинского государственного университета. Образование и здравоохранение 2021; Сикилинда В.Д., Алабут А.В. Протоколы техники пункций суставов и лечебных блокад при травмах и орто-педических заболеваниях опорно-двигательного аппарата. Главный врач Юга России 2018; 2: 14–20.Приказ Минздрава России от 12.11.2012 N 900н «Об утверждении Порядка оказания медицинской помощи взрослому населению по профилю “ревматология”».Ingale D., Kulkarni P., Electricwala A., Moghe A.,Kamyab S., Jagtap S., Martson A., Koks S., Harsulkar A.Synovium-synovial fluid axis in osteoarthritis pathology: a keyregulator of the cartilage degradation process. Genes (Basel)2021; 12(7): 989, https://doi.org/10.3390/genes12070989.Mustonen A.M., Käkelä R., Joukainen A., Lehenkari P., Jaroma A., Kääriäinen T., Kröger H., Paakkonen T., Sihvo S.P., Nieminen P. Synovial fluid fatty acid profiles are differently altered by inflammatory joint pathologies in the shoulder and knee joints. Biology (Basel) 2021; 10(5): 401, https://doi.org/10.3390/biology10050401.Kriegova E., Manukyan G., Mikulkova Z., Gabcova G., Kudelka M., Gajdos P., Gallo J. Gender-related differences observed among immune cells in synovial fluid in knee osteoarthritis. Osteoarthritis Cartilage 2018; 26(9): 1247–1256, https://doi.org/10.1016/j.joca.2018.04.016.BirkelundS., BennikeT.B., KastaniegaardK., Lausen M., Poulsen T.B.G., Kragstrup T.W., Deleuran B.W.,Christiansen G., Stensballe A. Proteomic analysis of synovial fluid from rheumatic arthritis and spondyloarthritis patients. Clin Proteomics 2020; 17: 29, https://doi.org/10.1186/s12014-020-09292-9.Timur U.T., Jahr H., Anderson J., Green D.C., Emans P.J., Smagul A., van Rhijn L.W., Peffers M.J., Welting T.J.M. Identification of tissue-dependent proteins inknee OA synovial fluid. Osteoarthritis Cartilage 2020; 29(1): 124–133, https://doi.org/10.1016/j.joca.2020.09.005.Ali N., Turkiewicz A., Hughes V., Folkesson E., Tjörnstand J., Neuman P., Önnerfjord P., Englund M. Proteomics profiling of human synovialfluid suggests increased protein interplay in early-osteoarthritis (OA) that is lost in late-stage OA. Mol Cell Proteomics 2022; 21(3): 100200, https://doi.org/10.1016/j.mcpro.2022.100200.Berthoud O., Coiffier G., Albert J.D., Gougeon- Jolivet A., Goussault C., Bendavid C., Guggenbuhl P. Performance of a new rapid diagnostic test the lactate/ glucose ratio of synovial fluid for the diagnosis of septic arthritis. Joint Bone Spine 2020; 87(4): 343–350, https://doi. org/10.1016/j.jbspin.2020.03.009.Jaggard M.K.J., Boulangé C.L., Graça G., Akhbari P., Vaghela U., Bhattacharya R., Williams H.R.T., Lindon J.C., Gupte C.M. The influence of sample collection, handling and low temperature storage upon NMR metabolic profiling analysis in human synovial fluid. J Pharm Biomed Anal 2021; 197: 113942, https://doi.org/10.1016/j.jpba.2021.113942.Krishnan G.H., Nanda A., Natarajan A.R. Synovial fluid density measurement for diagnosis of arthritis. Biomed Pharmacol J 2015; 7(1): 221–224, https://doi.org/10.13005/bpj/476.Microcomputed tomography (microCT) in medicine and engineering. Orhan K. (editor). Cham: Springer; 2020; https://doi.org/10.1007/978-3-030-16641-0.Rzhepakovsky I., Siddiqui S.A., Avanesyan S., Benlidayi M., Dhingra K., Dolgalev A., Enukashvily N. Fritsch T., Heinz V., Kochergin S., Nagdalian A., Sizonenko M., Timchenko L., Vukovic M., Piskov S., Grimm W.D. Anti-arthritic effect of chicken embryo tissue hydrolyzate against adjuvant arthritis in rats (X-ray microtomographic and histopathological analysis). Food Sci Nutr 2021; 9(10): 5648–5669, https://doi. org/10.1002/fsn3.2529.